儀器法

應(yīng)用儀器測(cè)定菌數(shù)是現(xiàn)代菌數(shù)檢測(cè)技術(shù)的一種發(fā)展動(dòng)向。粒子計(jì)數(shù)器用于菌數(shù)檢測(cè)已有報(bào)道，但本法僅適用于無(wú)雜質(zhì)顆粒供試液的菌懸液計(jì)數(shù)，一般不適用于藥品的染菌量檢測(cè)，因?yàn)槿我浑s質(zhì)顆粒都會(huì)誤計(jì)在內(nèi)。下面作扼要介紹∶

粒子計(jì)數(shù)器的基本原理：電解溶液經(jīng)過(guò)有孔管的微孔時(shí)有電流，當(dāng)任何相對(duì)不導(dǎo)電的粒子通過(guò)微孔時(shí)，微孔內(nèi)電阻增大，使微孔切面上電壓增高，致使兩端電壓發(fā)生變化，通過(guò)微孔的每一粒子增大電壓可以被放大、記錄和計(jì)數(shù)。細(xì)菌細(xì)胞則屬不導(dǎo)電的粒子，可被計(jì)數(shù)。

粒子計(jì)數(shù)器的主體部分為有孔管，其余為電子測(cè)量和記錄部分。有孔管的孔徑有10μm、30μm、100μm等，可以根據(jù)粒子大小而選擇。有孔管的一端連結(jié)真空泵與水銀壓力計(jì)，水銀壓力計(jì)上裝有液量計(jì)測(cè)的電極接點(diǎn)。測(cè)定電極的正極在有孔管內(nèi)，負(fù)極在燒杯中。測(cè)定開(kāi)始時(shí)，將有孔管置入被測(cè)菌懸液中，打開(kāi)真空泵活塞、減壓、菌懸液進(jìn)有孔管內(nèi)，同時(shí)水銀壓力計(jì)上升。關(guān)閉活塞測(cè)定開(kāi)始，水銀壓力計(jì)緩慢向左移動(dòng)，相應(yīng)的流人菌懸液。其中計(jì)量決定于電極1和2的距離。電壓變化形成脈沖，經(jīng)放大后進(jìn)入示波器，計(jì)數(shù)。

粒子計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)能力≥5×10⁴/分，并能在若干秒內(nèi)按顆粒大小決定出分布。粒子計(jì)數(shù)器的最大缺點(diǎn)就是它只識(shí)別顆粒大小，而不能區(qū)分是否細(xì)胞，其次混合各種細(xì)胞時(shí)，測(cè)定誤差較單一菌株為大。

除粒子計(jì)數(shù)器外，應(yīng)用電路的阻抗特性變化，進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)測(cè)定也有報(bào)道。菌數(shù)的檢測(cè)還有其他方法，例如比濁法、光密度法、菌體干重法、疊集細(xì)胞體積法等，但這些檢測(cè)法都要求較大菌量，不太適用于藥品染菌量的測(cè)定。