微生物實驗技術之細菌的接種、分離、培養(yǎng)(四)
發(fā)布時間:2021-12-11瀏覽:1112
接種技術
接種的技術方法有多種,根據(jù)接種的目的和使用的培養(yǎng)基不同,分別采用。接種時經常使用的接種環(huán)或接種針,在每次使用的前后均應燒灼滅菌。有的接種技術,要用無菌吸管或無菌注射器進行。所有的接種技術方法,基本的程序相同,即接種環(huán)燒灼并冷卻或無菌吸管→沾取培養(yǎng)物或吸取樣品稀釋液→接種培養(yǎng)基中(包括拔塞或開蓋,接種后立即塞塞或蓋蓋)→接種環(huán)燒灼后放置或吸管置于消毒液中。
液體培養(yǎng)基接種法 此法用于肉湯、蛋白胨水、糖發(fā)酵管、增菌液等各種液體培養(yǎng)基的接種。用接種環(huán)挑取單個菌落或純培養(yǎng)物,向作傾斜的培養(yǎng)基試管或錐形瓶中的內壁與液體接觸空白處,輕輕涂抹,再將培養(yǎng)基直立,此接種點被淹沒,細菌即在培養(yǎng)基中擴散。
藥品的無菌檢查,用無菌注射器吸取供試液向規(guī)定使用的液體培養(yǎng)基內接種。 藥品的大腸埃希氏桿菌及致病菌檢驗,用無菌吸管吸取供試液向 BL或 GN 等不同的增菌液內接種。
細菌在液體培養(yǎng)基內的生長現(xiàn)象,基本上分為混濁、菌膜、沉淀三種。以藥品中檢驗的細菌為例:
大腸埃希氏桿菌、沙門菌、志賀菌均為混濁生長;
銅綠假單胞菌為專性需氧菌,在培養(yǎng)基表面可形成菌膜,膜下混濁,越往下菌越少;
金黃色葡萄球菌也為均勻混濁生長,但有部分細菌可沉淀于管底。