醫(yī)療器械細菌內毒素試驗是利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產生的細菌內毒素，以判斷供試品中細菌內毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。細菌內毒素是在革蘭氏陰性細菌的細胞壁中發(fā)現的脂多糖 (LPS)。當內毒素進入血液或 CSF（腦脊液）時會引起發(fā)熱，因此也稱為熱原。在發(fā)布無菌產品之前，測試細菌內毒素是必不可少的，尤其是在制藥行業(yè)。細菌內毒素或熱原測試是在藥物和與心血管、淋巴系統(tǒng)或腦脊液相關的醫(yī)療設備等醫(yī)療效果釋放之前對內毒素進行的體外測試。

一、醫(yī)療器械細菌內毒素試驗原理

利用鱟試劑與細菌內毒素產生凝聚反應的機制，以判斷供試品中細菌內毒素的限量是否符合規(guī)定。如經檢驗證實供試品對細菌內毒素試驗有不能排除的干擾作用則不適宜采用本試驗。本試驗操作過程應防止內毒素的污染。

在使用一批新的鱟試劑進行供試品細菌內毒素檢查或供試品干擾試驗前，實驗室必須進行鱟試劑靈敏度復核試驗。目的為考察鱟試劑的靈敏度是否準確，同時也考查檢驗人員操作方法是否正確及試驗條件是否符合規(guī)定。

二、醫(yī)療器械細菌內毒素試驗步驟

細菌內毒素標準溶液的制備---待復核鱟試劑的準備----加樣----觀察并記錄結果將試管架。

溶解鱟試劑及混勻供試品和鱟試劑時，不要劇烈振蕩避免產生氣泡；試驗過程中應注意更換吸頭，以避免檢查用水的污染及溶液的交叉污染。

由于凝集反應是不可逆的，所以在反應過程中及觀察結果時應注意不要使試管受到振動，以免使凝膠破碎產生假陰性結果。

從水浴或恒溫器中輕輕取出，避免振動，將每管拿出緩緩倒轉 180°觀察，若管內形成凝膠，并且凝膠不變形，不從管壁滑脫者為陽性，記錄為（＋）；未形成凝膠或形成的凝膠不堅實、變形并從管壁滑脫者為陰性，記錄為（-）。保溫和拿取試管過程應避免受到振動造成假陰性結果。

結果判斷：當λc 在 0.5~2.0 λ（包括 0.5 λ 和 2.0 λ）時判定該批鱟試劑靈敏度復核合格，可用于干擾試驗和供試品細菌內毒素檢查，并以λ（標示靈敏度）為該批鱟試劑的靈敏度。

三、供試品細菌內毒素檢查

在細菌內毒素檢查中，每批供試品必須做2支供試品管和2支供試品陽性對照，同時每次試驗須做2支陽性對照和2支陰性對照。

四、醫(yī)療器械細菌內毒素試驗相關法規(guī)標準

（1）國內法規(guī)

《中國藥典》2020年版 第四部1143 細菌內毒素檢查法

醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法 第2部分：生物學試驗方法 GB/T 14233.2-2005

（2）國外法規(guī)

美國藥典細菌內毒素測試 42-NF37:2020

英國藥典 BP 2019 . 附錄 XIV C

美國藥典細菌內毒素測試 USP–NF 2022

歐洲藥典 9.5 2.6.14

歐洲藥典 10.8 2.6.14。

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