微生物檢驗-細菌計數(shù)(二)
發(fā)布時間:2022-02-04瀏覽:1158
平板法是一種有條件的計數(shù)法,其限制條件大致如下:
1、細菌計數(shù)是以平板上生長的菌落數(shù)為基礎
即每一個菌落代表一個菌細胞,亦即所謂"一對一"的關系,但實際上自然界存在的細菌常為團塊聚集體,有的細菌其特征就是多細胞相聯(lián),如雙球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌等。測定時與勻質(zhì)方式、條件關系極為密切;分散充分時,菌落生長數(shù)多、反之菌落數(shù)就少。故制備供試液時,力求均勻分散。但完全分散為單個細胞也是不可能的。故細菌數(shù)測定值實際上是菌落形成單位數(shù)(Colony fomming units,CFU);一個菌落就是一個菌落形成單位,它可以由一個也可以由多個菌細胞形成。
2. 受特定培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件限制
改變其中任一培養(yǎng)條件,就會改變被測菌類與數(shù)量?,F(xiàn)行方法適用于多數(shù)需氧或兼性厭氧細菌生長,即采用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、溫度為30~35℃、培養(yǎng)時間為48h,需氣培養(yǎng)。
美、英、日等國是用大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基,營養(yǎng)條件不一,就可能導致測定結果不一致。
3. 有繁殖能力的菌細胞才能被認定"活菌"
因此,僅有繁殖能力的菌細胞才能形成菌落。死菌及某些受損傷的細菌或營養(yǎng)要求苛刻的細菌不能在規(guī)定的培養(yǎng)基上形成菌落,因而不被計數(shù)。欲計數(shù)某些有特殊生長要求的細菌數(shù),須采用相應的方法。
以上三點既是平板法的特殊性,也是檢驗操作中必須重視的問題。